分子生物学是当前生命科学领域的学科，其理论与技术已进入到各学科领域，而分子生物学实验在生命学科中显得相当重要。在实际工作中，许多实验材料比如动物身上的肌肉组织、结缔组织、骨组织、毛发组织等，植物的根、茎、叶、种子等均需磨碎，随后才能对其成分、与蛋白质及结构和功能进行研究。

利用液氮研磨组织法在分子生物学实验中应用广

泛，特别是有关核糖核酸（RNA）、脱氧核糖核酸（DNA）的分离。液氮的温度为一196℃，它既能使各种组织成分不易被破坏或降解，又能使组织变硬，脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的温度极低，操作时要特别小合。为此，我们摸索总结了一套简便而行之有效的方法。

1液氮容器的准备

液氮一般保存于液氮罐中。实验前先准备一个保温桶，将适量液氮转移至保温桶中，同时还要准备一个不锈钢或塑料汤勺，汤勺的柄不够长时要想办法加长，以免伤手。

2组织的处理及用量

任何组织在获得后如不立即使用，要尽快保存在低温环境中一196℃液氮中速冻，一70℃保存。使用时，植物组织应当先用自来水清洗外表的泥沙，用单蒸水冲洗两遍，用乙醇浸洗约秒，再用除菌双蒸水冲洗两遍，用无菌滤纸吸干，然后根据需要取适当部位的组织。动物组织不必清洗，但要尽量剔除周边的组织及血块。组织的取量要比实际需要量大一倍，因为研磨时部分组织会粘在研钵和研棒上，会致部分组织样本丢失。

3研钵的固定

我们在实验时发现，研钵在加液氮后温度很低，外表会形成许多冰晶，用力研磨组织时易打滑，研钵内的组织液氮混合物很容易溅出，造成组织丢失，也容易伤手。如果在研钵下垫些纱布或滤纸，虽不易滑动，但由于缓冲作用，研磨时不受力，不足取。后来我们作了如下改进一是做个木支架，即选一块厚约两寸的木板，在上面挖个半球形圆洞大小根据研钵大小而定，木板两端留一定长度以备手握之用，使用时将研钵卡在半球形洞中，既稳当又不会伤手二是备一条干净的毛巾或纱布干的，折成长条形，将研钵包围起来，两端合并后用手抓住，这个方法简单实用，但要特别小心，以免伤。

4研磨方法

空钵先用液氮预冷，再将研棒的上端用纱布包裹用力时手不会痛，组织建议切成薄片，研磨时不易溅出，也更容易磨碎，研棒建议顶着手心，这样便于用力。研磨过程中要避免液氮干涸，研磨至细粉即可。待液氮刚蒸发完时，用一个小药勺取出所需用量进行下一步实验，或者将组织粉末装人容器内，保存于一70℃的温度下，以备下一步实验使用。

使用得当的液氮研磨组织法，将为下一步实验成功奠定了基础。值得一提的是，操作中所有接触的器皿及耗材须清洗干净并。如果研磨组织用于提取时，使用的器皿及耗材必须采用焦碳酸二乙醋灭活RNase并进行高压处理。

5研磨球

建议使用氧化锆珠，磨耗低，属于陶瓷球，不含重金属，研磨效率高。